产品简介

麦胚凝集素（Wheat Germ Agglutinin, WGA）是一种能与N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸结合的凝集素。作为生物学应用领域研究最深入且最具实用价值的凝集素之一，WGA因其与糖缀合物的结合特性，其衍生物和偶联物被广泛用于细胞膜及纤维化瘢痕组织的荧光标记与成像分析。WGA的糖结合特异性针对β-1,4-葡萄糖胺连接残基序列（即壳多糖寡糖）。每个单体含有两个相同且互不干扰的结合位点，可特异性识别3至4个β-1,4-葡萄糖胺单元。在已检测的单糖中，仅N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）能与WGA结合；N-乙酰甘露糖胺（ManNAc）无结合能力；N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）仅呈现微弱结合。WGA对含重复序列Galβ(1→4)GlcNAcβ(1→3)（即多聚乳糖胺型聚糖）的大分子寡糖内部GlcNAc残基具有高亲和力结合。N-乙酰神经氨酸仅与WGA发生低亲和力相互作用。WGA展现出复杂的糖特异性模式，可用于复杂碳水化合物的结构分析。iFluor®488标记的WGA可能是目前荧光强度最高的WGA偶联物，其呈现iFluor®488染料特有的明亮绿色荧光。该偶联物与AF488 WGA偶联物类似，能特异性结合唾液酸和N-乙酰葡萄糖胺残基。

产品性质

Ex (nm)：491

Em (nm)：516

溶剂：Water

适用仪器

荧光显微镜  

Ex:               FITC 滤波片组

Em：            FITC 滤波片组

推荐孔板:          黑色透明底板

储备液的配制

除非另有说明，所有未使用的储备液应在配制后分装为单次使用量，并储存于-20℃。避免反复冻融。

iFluor® 488-麦胚凝集素（WGA）偶联物储备液（200倍浓缩）：将500微升ddH₂O加入粉末中，配制成2毫克/毫升的储备液。

注意：复溶后的偶联物溶液可短期储存于2-8℃，长期储存需置于-20℃。

工作液的配制

iFluor® 488-麦胚凝集素（WGA）偶联物工作液（1倍浓度）：取5微升200倍浓缩的WGA偶联物溶液，加入1毫升HHBS缓冲液中。

注意：最佳染色浓度可能因细胞系不同而有所差异。推荐活细胞起始浓度为5-10微克/毫升。

实验操作参考

将小瓶置于室温下回温，开启前短暂离心。染色方案因应用场景而异，偶联物的适当稀释比例需通过实验确定。

活细胞染色;

1、用HHBS缓冲液洗涤细胞两次。

2、加入100微升iFluor® 488-WGA工作液。

3、在37℃条件下，用WGA工作液孵育细胞10-30分钟。

4、用HHBS缓冲液再次洗涤细胞两次。

5、在荧光显微镜下使用FITC滤光片组观察细胞成像。

固定细胞染色：WGA偶联物也可用于固定细胞染色。

1、用含4%多聚甲醛的PBS溶液固定细胞。

注意：若进行固定细胞膜染色，建议省略透化步骤。若在固定后增加透化步骤，则有助于对细胞内区室（如高尔基体和内质网结构）进行染色。

2、加入100 µL iFluor® 488-WGA工作液。

3、将细胞与WGA工作液在室温下孵育10-30分钟。

4、用HHBS缓冲液洗涤细胞两次。

5、使用荧光显微镜配合FITC滤光片组对细胞进行成像。

运输与保存方法

冰袋运输。在零下15度以下保存, 避免光照。

注意事项 ：

1、该产品不适用于革兰氏阴性细菌。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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