产品简介

麦胚凝集素（WGA）是一种被广泛研究的凝集素，以其对N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸的高亲和结合能力而著称，使其成为多种生物学应用中的重要工具。WGA与糖缀合物的相互作用使其衍生物和偶联物在荧光成像与分析领域得到广泛应用，可用于标记酵母芽痕、纤维化瘢痕组织以及革兰氏细菌和哺乳动物细胞的细胞膜。WGA特异性靶向由β-1,4-葡萄糖胺残基连接形成的序列（称为壳聚糖寡糖）。每个单体含有两个相同的、互不干扰的结合位点，可互补结合3或4个β-1,4-葡萄糖胺单元。在已测试的单糖中，仅葡萄糖胺（GlcNAc）表现出与WGA的强结合，甘露糖胺（ManNAc）无结合能力，而半乳糖胺（GalNAc）则呈现弱结合。iFluor® 680标记的WGA具有该染料特有的明亮远红光荧光特性（激发/发射波长=684/701 nm）。值得注意的是，与Alexa Fluor® 680 WGA偶联物类似，iFluor® 680 WGA偶联物仍能保持对唾液酸和N-乙酰葡萄糖胺残基的结合能力，从而增强了其在各类科学研究荧光成像与分析中的应用价值。

产品性质

Ex (nm)：684

Em (nm)：701

溶剂：Water

适用仪器

荧光显微镜  

Ex:                     Cy5 滤波片组

Em：                    Cy5 滤波片组

推荐孔板:                  黑色透明底板

储备溶液配制

iFluor 680 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物储备液 (200X)：将 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的储备溶液。

注意：重新配制的缀合物溶液可在 2-8 °C 下短期储存，或在 -20 °C 下长期储存。

工作溶液配制

iFluor 680小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物​​工作溶液 (1X)：将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。

注意：不同细胞系的优化染色浓度可能不同。 活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。

操作方案

活细胞染色

1. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

2. 添加 100 µL iFluor 680-WGA 工作溶液。

3. 将细胞与 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟。

4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5. 使用 Cy5 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。

固定细胞染色

1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定细胞。

注意：对于固定细胞膜染色，建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色，如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。

2. 添加 100 µL iFluor 680-WGA 工作溶液。

3. 在室温下，用 WGA 工作溶液孵育细胞 10-30 分钟。

4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5. 使用 Cy5 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。

运输与保存方法

冰袋运输。在零下15度以下保存, 避免光照。

注意事项 ：

1、该产品不适用于革兰氏阴性细菌。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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