产品简介

麦胚凝集素（WGA）是一种被广泛研究的凝集素，以其对N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸的高亲和力结合而著称，使其成为多种生物学应用中的重要工具。它与糖缀合物的相互作用使得WGA衍生物及偶联物在荧光成像和分析中得到广泛应用，可用于标记酵母芽痕、纤维化瘢痕组织以及革兰氏细菌和哺乳动物细胞的细胞膜。WGA特异性靶向由β-1,4-葡萄糖胺连接残基组成的序列，即壳聚糖寡糖。每个单体包含两个相同的、互不干扰的结合位点，可结合3或4个β-1,4-葡萄糖胺单元。在所测试的单糖中，只有葡萄糖胺（GlcNAc）表现出与WGA的强结合，而甘露糖胺（ManNAc）则无结合，半乳糖胺（GalNAc）仅显示弱结合。iFluor® 750标记的WGA呈现出独特的远红光荧光特性，最大发射波长为779 nm。值得注意的是，iFluor® 750-WGA偶联物仍保留其与唾液酸和N-乙酰葡萄糖胺残基结合的能力，从而增强了其在多种科学研究中的荧光成像和分析应用价值。

产品性质

Ex (nm)：757

Em (nm)：779

溶剂：Water

适用仪器

荧光显微镜  

Ex:                   Cy7 滤波片组

Em：                  Cy7 滤波片组

推荐孔板:                黑色透明底板

储备溶液配制

iFluor 750 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物储备液 (200X)：将 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的储备溶液。

注意：重新配制的缀合物溶液可在 2-8 °C 下短期储存，或在 -20 °C 下长期储存。

工作溶液配制

iFluor 750小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物​​工作溶液 (1X)：将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。

注意：不同细胞系的优化染色浓度可能不同。 活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。

操作方案

活细胞染色

1. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

2. 添加 100 µL iFluor 750-WGA 工作溶液。

3. 将细胞与 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟。

4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5. 使用 Cy7 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。

固定细胞染色

1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定细胞。

注意：对于固定细胞膜染色，建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色，如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。

2. 添加 100 µL iFluor 750-WGA 工作溶液。

3. 在室温下，用 WGA 工作溶液孵育细胞 10-30 分钟。

4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5. 使用 Cy7 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。

运输与保存方法

冰袋运输。在零下15度以下保存, 避免光照。

注意事项 ：

1、该产品不适用于革兰氏阴性细菌。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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