产品简介

麦胚凝集素(WGA)是一种经过充分研究的凝集素，已知其对N-乙酰-D-氨基葡萄糖和唾液酸的结合亲和力，使其成为各种生物应用中的有价值的工具。它与糖缀合物的相互作用使得WGA衍生物和缀合物能够广泛用于荧光成像和分析，便于标记酵母芽疤痕、纤维化疤痕组织和革兰氏细菌和哺乳动物细胞的细胞膜。WGA特异性靶向被称为壳糊精的β-1，4-GlcNAc连接的残基序列。每个单体包含两个相同的、不相互作用的结合位点，与3或4个β-1，4-GlcNAc单元互补。在测试的单糖中，只有GlcNAc显示出与WGA的强结合，而ManNAc显示出无结合，而GalNAc显示出弱结合。WGA的iFluor 350缀合物具有iFluor 350染料的明亮的蓝色荧光特征(Ex/Em = 345/450 nm)。值得注意的是，与Alexa Fluor 350 WGA缀合物一样，iFluor 350 WGA缀合物保留了其结合唾液酸和N-乙酰氨基葡萄糖残基的能力，增强了其在荧光成像和各种科学研究分析中的效用。

产品性质

Ex (nm)：345

Em (nm)：450

溶剂：Water

适用仪器

荧光显微镜  

Ex:                         DAPI 滤波片组

Em：                   DAPI 滤波片组

推荐孔板:                 黑色透明底板

储备溶液配制

iFluor 350 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物储备液 (200X)：将 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的储备溶液。

注意：重新配制的缀合物溶液可在 2-8 °C 下短期储存，或在 -20 °C 下长期储存。

工作溶液配制

iFluor 350小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物工作溶液 (1X)：将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。

注意：不同细胞系的优化染色浓度可能不同。 活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。

操作方案

活细胞染色

1. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

2. 添加 100 µL iFluor 350-WGA 工作溶液。

3. 将细胞与 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟。

4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5. 使用 DAPI 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。

固定细胞染色

1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定细胞。

注意：对于固定细胞膜染色，建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色，如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。

2. 添加 100 µL iFluor 350-WGA 工作溶液。

3. 在室温下，用 WGA 工作溶液孵育细胞 10-30 分钟。

4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5. 使用 DAPI 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。

运输与保存方法

冰袋运输。在零下15度以下保存, 避免光照。

注意事项 ：

1、该产品不适用于革兰氏阴性细菌。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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